En la definición dada por el fundador, en el momento de la creación de la Universidad
se plasma el espíritu rosarista de la siguiente forma:

El Colegio Mayor de Nuestra Señora del Rosario es una Congregación de personas mayores, escogidas para sacar en ellas varones insignes, ilustradores de la república con sus grandes letras y con los puestos que merecerán con ellas, siendo en todo el dechado del culto divino y de las buenas costumbres, conforme al estado de su profesión (1653).